Semen Congelado SBS

• ¿Cuántos espermatozoides ponen en cada dosis?

  Cada dosis inseminante preparada por un Laboratorio Afiliado de SBS incluye un mínimo de 800 millones de espermatozoides totales Y excede el mínimo recomendado en la industria de 200 millones de motilidad progresiva por dosis descongelada.

• ¿Cuántas pajillas se requieren para una dosis inseminante?

  Una dosis inseminante preparada por un Laboratorio Afiliado de SBS está estandarizada para incluir ocho pajillas de 0.5 ml. El semen es congelado con una concentración de 200-250 millones/ml, resultando en un total de 800 millones a 1000 millones de espermatozoides en una dosis final con un volumen de 4 ml. Debido a que nuestra motilidad progresiva mínima recomendada para comercialización es de 30% post-descongelación, cada dosis inseminante excede el mínimo recomendado en la industria de 200 millones de espermatozoides con motilidad progresiva post-descongelación por dosis.

• ¿Cómo se evalúa la calidad del semen congelado?

  Realizamos una evaluación post-descongelación de dos pajillas tomadas de cada eyaculado congelado. Una vez descongelado, el semen se cultiva para descartar la presencia de crecimiento bacteriano, y la motilidad espermática se evalúa visualmente y también utilizando un modelo CEROS de Hamilton-Thorne automático de análisis de motilidad. Este análisis de motilidad se realiza luego de diluir el semen e incubarlo a 37°C por 30 minutos. Un análisis computarizado de espermatozoides (Computer Assisted Sperm Analysis “CASA”) permite una evaluación objetiva de motilidad espermática y provee información sobre la motilidad progresiva y total, así como los parámetros de velocidad. No obstante lo anterior, es importante recordar que, aunque la motilidad es un indicador de relativa salud celular, la fertilización es un proceso complejo que requiere numerosos atributos funcionales tanto de los espermatozoides como del óvulo. Por lo tanto, la fertilidad real de este o cualquier semen congelado solo puede ser determinado a través de una inseminación debidamente sincronizada de yeguas con buena salud reproductiva.

• ¿Qué pruebas sanitarias se realizan a los sementales antes de la congelación?

  Para colecciones realizadas en la Unión Europea

  El semen debe ser recolectado y congelado en un centro de colección aprobado bajo normas específicas de cuarentena y salud dictadas por el Estado miembro de la UE.

  Se requieren las siguientes pruebas sanitarias:

  - Anemia Infecciosa Equina (AIE)

  - Arteritis Viral Equina (AVE)

  - Metritis Contagiosa Equina (MCE); dos juegos de 4 muestras (uretra, fosa uretral, prepucio y semen/fluido pre-eyaculatorio) con 7 días de espacio

  Adicionalmente, algunos Laboratorios Afiliados en la UE requieren pruebas de muermo, durina, y Herpesvirus Equino.

  Hay tres opciones para producir semen congelado en la UE.

  1.) El semental debe ser un residente por treinta días antes de comenzar la sesión de congelación de semen. En este caso el semental se sujeta a pruebas sanitarias en los 30 días siguientes a entrar a centro de colección y en no menos de 14 días después de entrar al centro de colección. Para los sementales que son residentes continuos de las instalaciones aprobadas, todos las pruebas mencionadas deben ser realizadas al menos una vez al año, al inicio de cada temporada reproductiva.

  2.) Los sementales residentes (como la situación #1) pueden ser trasladados dentro y fuera del centro de colección (hasta un máximo de 14 días fuera), pero deben realizarse pruebas adicionales en intervalos fijos durante el periodo de congelación de semen (e.g., AIE cada 90 días, AVE cada 30 días y MCEs cada 60 días).

  3.) Los sementales no residentes pueden ser trasladados dentro y fuera del centro de colección. Las pruebas sanitarias deben realizarse previo a su entrada al centro y deben ser repetidas entre 14 y 90 días después de completar la sesión de congelación.

  Cada país miembro de la UE selecciona qué regla seguir. Italia y Alemania siguen la regla número 1, tanto para producción de semen doméstica y para exportación. Suecia permite que el médico escoja la regla cuando se congele semen para exportación. Para semen de uso doméstico, Suecia requiere que las pruebas de AVE y MCE se realicen antes de que el semental ingrese a las instalaciones, y el centro de colección no puede congelar semen para exportación mientras haya un semental dentro de las instalaciones congelándose para uso doméstico. Irlanda permite escoger entre la regla 1 o 2.

  Para sementales colectados en Norteamérica

  A diferencia de la UE, a menos que el semen que se esté congelando sea para exportación, no existen pruebas sanitarias obligatorias establecidas por el gobierno ni por una entidad de regulación veterinaria en Estados Unidos. Asimismo, no hay requerimiento de que el semen sea colectado o procesado en instalaciones inspeccionadas o aprobadas por ninguna entidad de gobierno ni de regulación veterinaria. Con el fin de proveer un alto estándar de calidad en producción y distribución desde los laboratorios SBS, hemos establecido una política de pruebas sanitaria para todos los sementales que ingresan a nuestros laboratorios. A pesar de que pueden existir algunas variaciones en los requerimientos entre cada Laboratorio Afiliado, todos los sementales son sujetos a las siguientes pruebas:

  - Anemia Infecciosa Equina (AIE) entre 6-12 meses de su llegada

  - Arteritis Viral Equina (AVE) entre los primeros 30 días después de su llegada

  Adicionalmente, muchos Laboratorios Afiliados SBS requieren también que los sementales obtengan resultados negativos de las pruebas de Estomatitis Vesicular (EV) y Metritis Contagiosa Equina (MCE).

  En el caso de la congelación de semen para exportación, se requiere un calendario de pruebas similar al descrito para la Unión Europea, dependiendo de los requerimientos del país de importación.

  Para sementales colectados en Australia

  Al igual que en Estados Unidos, en Australia no hay pruebas sanitarias obligatorias para colección y congelación de semen para uso doméstico. Australia es reconocida por ser libre de MCE y no se han reportado casos de AVE. Para la congelación de semen para exportación el semen debe ser colectado y procesado en un centro de colección aprobado y deben realizarse las pruebas sanitarias según requiera el país de importación.

  Nota: Los requerimientos sanitarios incluidos en este documento se exponen como guías de carácter general y pueden cambiar con el tiempo, a partir de nuevas regulaciones gubernamentales, brotes de enfermedades y cambios en la política de SBS. Consulte siempre con su Laboratorio Afiliado para determinar requerimientos específicos.

• ¿Cómo puedo publicar a mi semental en la Guía de Sementales?

  La Guía de Sementales es una herramienta de mercadeo GRATUITA que ofrecemos a todos nuestros clientes de congelación de semen. La nueva Guía de Sementales tiene las siguientes ventajas:

  - Se pueden crear perfiles detallados de sementales, incluyendo fotos y video

  - Los propietarios de yeguas interesados pueden contactarlo por mensaje mediante la página web

  - Usted y sus propietarios de yeguas pueden ver y dar seguimiento en línea a sus pedidos de semen congelado 

  - La herramienta le brinda visibilidad a una amplia audiencia internacional

  Puede obtener más información en el siguiente enlace:

  How Do I Post my Stallion to the Stallion Guide

  Si tiene algún problema actualizando los perfiles de sus sementales, por favor contacte a SBS al (410) 885-3202, o mediante correo electrónico a info@selectbreeders.com

  La Guía de Sementales es un servicio complementario ara agentes/propietarios de sementales con semen congelado SBS que esté almacenado en un Laboratorio Afiliado SBS y que cumpla nuestros umbrales mínimos para comercialización.

Colección de semen para congelación

• ¿Qué edad debe tener mi semental para poderle colectar semen?

  Nuestra recomendación es que su caballo tenga al menos 3 años al momento de empezar a colectarle semen. A esta edad la mayoría de los caballos han madurado suficiente física y mentalmente para ser capaces de soportar el estrés adicional de ser un semental activo. Típicamente, es a esta edad que los testículos han madurado y empezado a producir suficiente semen apto para enfriar o congelar. Es posible congelar sementales más jóvenes, y hemos logrado colectar y congelar semen de sementales de 2 años. Sin embargo, advertimos a los propietarios el riesgo de que la calidad del semen a esa edad no sea aceptable para procesamiento. Aun si lo es, la producción total de semen es usualmente menor a la esperada en la madurez, y por ende podría no ser financieramente viable proceder con un programa completo de congelación en ese momento.

• ¿Cómo se entrena a un semental para usar el maniquí?

  En SBS dedicamos un tiempo a entrenar a los sementales para colectar usando un maniquí, con el fin de que tengan una experiencia agradable en el área de colección. Ubicamos en la caballeriza a una yegua en celo, y se permite al semental verla o tocarla, si es necesario, para obtener una erección. En ese momento también enseñamos al semental a permanecer quieto para lavarle el pene. A continuación, la yegua se posiciona al lado del maniquí y el semental se posiciona detrás del mismo, en el lado opuesto del maniquí, con el fin de que pueda alcanzar a olfatearla. Cuando el semental apoya su pecho sobre el maniquí para olfatear a la yegua, la respuesta típica a la excitación es montar el maniquí. Una vez montado sobre el maniquí, la yegua se mueve hacia adelante y el recolector coloca la vagina artificial en el pene del semental. En promedio, la mayoría de los sementales se pueden entrenar para colectar sobre el maniquí en una o dos sesiones de 30 minutos. Es importante que las sesiones de entrenamiento sean siempre positivas y recompensadas para inculcar una buena actitud en colecciones futuras.

• ¿Colectan sementales en el suelo?

  Sí, podemos entrenar y colectar a algunos sementales en el suelo. Siempre que sea posible, preferimos que el semental monte un maniquí o una yegua, sin embargo, en sementales con discapacidad física esto no siempre es posible, y por ende la colección en el suelo es una opción alternativa. Cuando el semental es colectado en el suelo, sus cuatro patas se mantienen en el suelo mientras eyacula. El éxito de estas colecciones depende en parte de la conducta, el libido y la discapacidad del semental.

• ¿Utilizan eyaculación química?

  Sí, ocasionalmente podemos realizar una eyaculación química. La eyaculación inducida químicamente con frecuencia no contiene las mismas proporciones de espermatozoides y fluido de los eyaculados obtenidos fisiológicamente, por ende, utilizamos eyaculación química solo cuando es necesario.

• ¿Cuánto tiempo toma remover los espermatozoides almacenados?

  Normalmente la remoción de espermatozoides viejos almacenados, que no soportan bien el estrés celular de la congelación, toma al menos tres colecciones de limpieza, y en ocasiones más, dependiendo del semental específico y de la frecuencia de su actividad sexual reciente. Algunos sementales tienen una tendencia a acumular esperma en sus ductos reproductivos, y por ende necesitan muchas más colecciones de limpieza para lograr adquirir semen de buena calidad.

• ¿Por qué es necesario realizar colecciones de limpieza antes de congelar semen?

  La espermatogénesis es un proceso continuo. Los espermatozoides se producen y se liberan desde los túbulos seminíferos a un ritmo constante. Existen áreas dentro del tracto reproductivo de los sementales donde los espermatozoides se almacenan. Estos espermatozoides viejos y almacenados en los ductos eferentes de los testículos y epidídimos son menos longevos, tienen menor capacidad para soportar el estrés celular producido por el enfriamiento y la congelación y, por lo tanto, se ve comprometida la motilidad y fertilidad post-descongelación.

• ¿Mi semental se debe quedar en sus instalaciones durante la congelación?

  Para sementales en Estados Unidos o Costa Rica

  No necesariamente. Si se está congelando el semen para uso doméstico, puede ser trasladado a las instalaciones para realizar la colección y regresar a su finca. Si al semental se le está congelando para exportar el semen, depende de los requerimientos del país importador. Hay una norma en las regulaciones de la Unión Europea que permite que un semental no residente sea trasladado dentro y fuera del centro de colección siempre y cuando se completen las pruebas sanitarias antes de su ingreso al centro y dentro de los 14-90 días después de la última colección. Para la exportación a otros países (Australia y Nueva Zelanda, por ejemplo) se puede requerir que el semental entre al centro de colección y se mantenga en cuarentena durante todo el período de pruebas sanitarias y de congelación.

  Para sementales en la UE

  Hay tres opciones para producir semen congelado en la UE.

  1.) El semental debe ser residente por treinta días antes de comenzar la sesión de congelación de semen. En este caso el semental se sujeta a pruebas sanitarias antes de entrar al centro de colección y en no menos de 14 días después de su ingreso al centro.

  2.) Los sementales residentes (como la situación #1) pueden ser trasladados dentro y fuera del centro de colección (hasta un máximo de 14 días fuera), pero deben realizarse pruebas adicionales en intervalos fijos durante el periodo de congelación de semen.
  3.) Los sementales no residentes pueden ser trasladados dentro y fuera del centro de colección. Las pruebas sanitarias deben realizarse previo a su ingreso al centro y deben ser repetidas entre 14 y 90 días después de completar la sesión de congelación.

  Cada país miembro de la UE selecciona qué regla seguir. Italia y Alemania siguen la regla número 1, por lo tanto, todos los sementales deben ser residentes y no pueden estarse trasladando dentro y fuera. Esto aplica tanto para producción de semen doméstica como para exportación. Suecia permite que el médico escoja la regla cuando se congele semen para exportación. Para semen de uso doméstico, el semental puede entrar y salir, pero el centro de colección no puede congelar semen para exportación mientras haya un semental dentro de las instalaciones congelándose para uso doméstico. Irlanda permite escoger entre la regla 1 o 2.

• ¿Cada cuánto colectan semen para congelación y por qué?

  Una vez finalizadas las colecciones de limpieza, colectamos en un itinerario de día de por medio (3-4 congelaciones por semana). Dejamos un día de descanso sexual para que el semental se recupere y produzca una cantidad adecuada de espermatozoides para mantener la eficiencia del costo de la congelación, sin dejar suficiente descanso para que se vea comprometida la calidad de los eyaculados.

• ¿Cuántas dosis de semen congelado se obtienen por cada colección?

  Esto depende enteramente de la producción de semen de cada semental en específico. El semental “promedio” produce alrededor de 8 dosis inseminantes por congelación cuando es colectado con un itinerario de día de por medio. La prueba de congelación puede ser una excepción. Como el eyaculado utilizado para la prueba de congelación se congela usando múltiples protocolos distintos, no es posible saber cuántos de los protocolos probados tendrán como resultado semen comercializable, ya que algunos de los tratamientos pueden dar como resultado una calidad post-congelación menor a la óptima.

• ¿Cuánto tiempo toma producir suficientes dosis de semen para inseminar 10 yeguas?

  La cantidad de tiempo que toma producir suficientes dosis para inseminar 10 yeguas depende de la capacidad productiva de cada semental en específico, el número de ciclos necesarios para lograr la preñez en las yeguas individuales y el número de dosis utilizadas en cada ciclo.

  - Producción de espermatozoides

  El número de dosis “promedio” producidas por cada eyaculado congelado es de 8, sin embargo, este número varía dependiendo de la producción de espermatozoides de cada semental en específico, que puede ser desde <3 a >20 dosis por eyaculado congelado. Los sementales normalmente se colectan para congelación en un itinerario de lunes-miércoles-viernes, por lo tanto, en una semana se puede producir un “promedio” de 24 dosis.

  - Número de ciclos

  No todas las yeguas van a concebir en el primer ciclo con monta natural o inseminación artificial. Por lo tanto, si quiere maximizar la preñez en un grupo de 10 yeguas, de una forma conservadora, se puede calcular tener suficiente semen para 2.5 ciclos reproductivos por yegua. Una yegua con buena fertilidad y buen manejo reproductivo debe ser capaz de concebir en 2 ciclos o menos.

  - Número de dosis por ciclo

  Otro aspecto a tomar en cuenta es la sincronización de la inseminación con semen congelado, y si la yegua será inseminada una sola vez (ya sea con una inseminación planificada o una inseminación post-ovulación) o dos veces (cuando la yegua se insemina pre- y post-ovulación). SBS recomienda disponer de dos dosis de semen congelado por cada ciclo reproductivo, de forma que el propietario de la yegua pueda administrar usando un protocolo de inseminación conveniente. Ver Management of Mares for Frozen Semen Insemination.
  Así, con 2.5 ciclos por yegua permite 2 dosis/ciclo, lo que quiere decir que por 10 yeguas necesitamos congelar 50 dosis de semen. Puesto que el semental promedio puede producir 8 dosis por eyaculado congelado, tomaría 6-7 congelaciones (2.5 semanas) para producir 50 dosis de semen. Esta es una estimación conservadora. Muchos propietarios de sementales que congelan por primera vez usualmente dedican 3 semanas. La primera semana se utiliza para colecciones de limpieza (lunes-martes-miércoles) y una prueba de congelación (viernes) y las dos semanas restantes se realizan las congelaciones en un itinerario de lunes-miércoles-viernes, lo cual genera 50-60 dosis para el semental promedio.

Congelación de semen

• ¿Qué implica la congelación de semen?

  Para procesar el semen para la congelación, el semen nativo se disuelve en un diluyente estándar a base de glucosa y leche descremada y se centrifuga para concentrar las células espermáticas y remover el plasma seminal. El plasma seminal contiene elementos que pueden ser protectores y a la vez dañinos para los espermatozoides. Es beneficioso remover el plasma seminal al congelar el semen. Anteriormente se pensaba que lo mejor era remover toda el plasma seminal, sin embargo, investigaciones más recientes indican que retener un poco de plasma seminal modera la respuesta inflamatoria del útero cuando se introducen células espermáticas dentro del mismo.

  Luego de la centrifugación, el semen se disuelve en el diluyente de congelación, el cual tiene una formulación compleja que incluye azúcares, sales, yema de huevo, leche descremada y un crioprotector, predominantemente glicerol. El semen se carga en pajillas o pajuelas y se congelan con nitrógeno líquido. Esto se puede realizar mediante dos métodos; ya sea poniendo a flotar una rejilla de pajuelas sobre nitrógeno líquido en una caja de poliestireno, o mediante una máquina programable especializada para la congelación de células. Todos los Laboratorios Afiliados de SBS utilizan congeladores de células programables. Un congelador programable ofrece la ventaja significativa de poder controlar, de forma confiable, la velocidad de enfriamiento con una precisión de 0.1 °C/minuto. Esto nos permite diseñar protocolos de enfriamiento definidos y precisos que son consistentes y repetibles en cada congelación. El método de congelación con vapor ofrece una capacidad limitada para ajustar la velocidad de enfriamiento y no permite la consistente repetitividad. Una vez congeladas, las pajillas de semen se almacenan en tanques de nitrógeno a -196°C.

• ¿Qué preparación se requiere antes de una prueba de congelación?

  Los espermatozoides viejos almacenados en los ductos eferentes de los testículos y los epidídimos tienen menor longevidad y una menor capacidad para soportar el estrés celular producido por el enfriamiento y la congelación y, por lo tanto, se puede ver comprometida la motilidad y fertilidad post-descongelación. Por lo anterior, normalmente realizamos una serie de colecciones de limpieza antes de hacer la prueba de congelación. Usualmente se requieren al menos tres colecciones de limpieza para deshacerse de los espermatozoides viejos almacenados, y en ocasiones se requieren más, dependiendo del semental y de la frecuencia reciente de su actividad sexual. Algunos sementales tienen la tendencia a acumular espermatozoides en sus tractos reproductivos, por lo cual se requieren más colecciones de limpieza para adquirir semen de buena calidad. Para más información puede ver nuestro artículo Sperm Accumulation in the Stallion.

• ¿Todos los sementales tienen semen que puede ser congelado?

  No a todos los sementales se les puede congelar semen. En nuestra experiencia dentro de la red de Laboratorios Afiliados de SBS, aproximadamente un 75% de todos los sementales con una calidad inicial normal de semen producen espermatozoides capaces de soportar el estrés de la congelación y descongelación. Lo anterior, basado en el estándar industrial para comercialización que es de una motilidad progresiva post-descongelación de ≥30%.

• ¿Si el semen de mi semental responde bien al enfriamiento, eso significa que también va a congelar bien?

  No necesariamente. Se espera que la mayoría de los sementales que enfrían bien también congelen de forma aceptable, pero este no es siempre el caso. Ocasionalmente, un semental muy fértil con buen índice de preñez con semen enfriado, no congela bien. La única forma de determinar qué tan bien se congela es realizando una prueba de congelación en una serie de protocolos (diferentes diluyentes y velocidades de enfriamiento) y realizar los análisis de motilidad post-descongelación para evaluar su potencial de congelamiento.

• ¿Hay un único procedimiento para congelar semen?

  Hay casi tantos métodos para congelar semen como médicos que congelan semen, y cada médico afirmará que ha desarrollado el mejor protocolo. Desafortunadamente, muchos de estos protocolos no han sido científicamente probados bajo condiciones controladas, y debido a la falta de calidad de control interno, los protocolos no son consistentes ni repetibles. En SBS tenemos cinco diferentes protocolos que evaluamos en la prueba de congelación. La diferencia entre cada protocolo radica ya sea en la formulación del diluyente o en la velocidad de congelación; todos los demás aspectos del protocolo de congelación se mantienen iguales. Adicionalmente, SBS utiliza un riguroso programa de control de calidad a través de nuestra red de Laboratorios Afiliados que es único en la industria y nos distingue de nuestros competidores.
  A continuación, algunos ejemplos de dónde puede estar la variación en el protocolo de congelación:

  - Tamaño de la pajilla

  El semen puede ser congelado en pajillas de 5ml o de 0.5ml. Adicionalmente, algunos técnicos pueden usar crioviales o pequeños paquetes. Abajo una explicación de por qué utilizamos pajillas de 0.5ml.

  - Formulación del diluyente

  Una de las mayores fuentes de variación es la formulación del diluyente, a pesar de que todos los diluyentes de semen contienen los mismos ingredientes esenciales básicos. Existen sutiles diferencias en la composición química y el agente crioprotector utilizado.

  - Concentración espermática

  El semen puede ser congelado con variables niveles de éxito en un amplio rango de concentraciones celulares. La concentración en que se congelen las células también índice en el número de pajillas por dosis y/o el total de espermatozoides por dosis. En SBS cada dosis inseminante es de 8 pajillas que contienen un total de espermatozoides desde 800 millones hasta 1000 millones.

  - Método de congelación

  El semen puede ser congelado en un congelador computarizado de células, y se pueden utilizar distintos programas con diferentes velocidades de enfriamiento. Algunos técnicos congelan semen sobre nitrógeno líquido en una caja de poliestireno. Abajo ofrecemos una explicación de por qué optamos por un congelador de células programable.

• ¿Los resultados de un procedimiento u otro varían para ciertos sementales?

  Cada semental es individual y sus respuestas a los distintos protocolos de congelación varían. Cuando congelamos a un semental por primera vez, realizamos una prueba de congelación comparando los cinco distintos protocolos; las diferencias entre cada tratamiento radican ya sea en la formulación del diluyente o en la velocidad de enfriamiento. El protocolo que dé los mejores resultados de motilidad post-descongelación es el que se selecciona para las siguientes congelaciones. Las investigaciones científicas aún no han contestado conclusivamente el por qué un semental prefiere un protocolo sobre otro, pero sin duda tiene que ver con una combinación de factores, incluyendo la composición de la membrana del semen del caballo, los componentes de su plasma seminal y su capacidad inherente para soportar la congelación. Sin embargo, en nuestra experiencia, definitivamente existen preferencias entre sementales sobre cuál procedimiento genera la mayor motilidad post-congelación.

• ¿Qué sucede si mi semental no pasa la prueba de congelación?

  Si su semental no produce semen de calidad comercializable (motilidad post-descongelación de >30%) con ninguno de los cinco protocolos básicos que utilizamos en las pruebas de congelación, sí tenemos otras opciones que intentar. Tenemos diluyentes adicionales disponibles tanto para centrifugación como para congelación, particularmente adecuados para los sementales que no responden bien a los protocolos principales, los cuales consideramos que son una minoría. Asimismo, existen otras técnicas de procesamiento de semen que podemos intentar. Así que no todo está perdido si su semental no logra congelar bien en la primera prueba de congelación, ya que tenemos otras opciones disponibles.
  Ocasionalmente, se puede producir semen debajo del umbral mínimo de motilidad progresiva de 30%. Si la motilidad progresiva post-descongelación está entre 25% y 30%, podríamos lograr obtener preñeces son ese semen ajustando la cantidad total de espermatozoides por dosis inseminante. Sin embargo, siempre recomendamos confirmar la fertilidad mediante una prueba de inseminación antes de considerar la comercialización del semen. Al respecto puede ver nuestro artículo Test Breeding as an Aid to Marketing Frozen Semen. El semen congelado con motilidad progresiva post-descongelación de <20% recomendamos reservarlo para uso en sus propias yeguas. Puede ver en nuestras Preguntas Frecuentes, ¿Puede preñar a una yegua con semen progresivo menor al 30%? En las sección de Expectativas sobre Semen Congelado.

• ¿Si mi semental no pasó la prueba de congelación, vale la pena intentar de nuevo?

  Definitivamente sí. Pueden haber muchas razones por las cuales los resultados de una prueba de congelación no son ideales en un momento determinado. Tal vez el semental viene directo de un circuito de competencias y todavía tiene en su sistema residuos de drogas o medicamentos, tal vez tuvo una fiebre no detectada o un trauma testicular antes de la colección de semen que pudo haber afectado la calidad del mismo, tal vez es aún muy joven y la calidad de su semen mejorará conforme madure. Asimismo, la calidad del semen de algunos caballos –y, por ende, su capacidad de congelación– puede estar dramáticamente afectada por temporada. Por ejemplo, si la prueba de congelación se realiza al final del verano, la calidad del semen se puede ver afectada por el estrés térmico. Por ende, es recomendable esperar entre dos y tres meses para repetir la evaluación cuando el estrés térmico se reduzca. Por otro lado, todo el tiempo hay avances en formulación de diluyentes y técnicas de procesamiento que pueden hacer la diferencia en un intento posterior. Por ejemplo, tuvimos un semental que regresó todos los años por cuatro años, y finalmente en el cuarto año logramos producir semen de calidad comercializable. Por lo tanto, siempre vale la pena intentar de nuevo en algún momento en el futuro.

• ¿Si a mi semental le han realizado una prueba de congelación en otro lugar, le tienen que hacer prueba de nuevo en SBS?

  Todo semental que ingrese por primera vez a un Laboratorio SBS debe someterse a un procedimiento de “prueba de congelación”. Este procedimiento está diseñado para determinar no solo si el semen de su caballo va a sobrevivir la congelación y descongelación, sino también cuál de todos los protocolos de congelamiento dará mejores resultados. Para realizar la prueba de congelación, el eyaculado se divide en cinco fracciones y se congela en cinco distintos protocolos. Estos protocolos varían en los diluyentes y curvas de congelación utilizadas. En SBS, producimos nuestros propios diluyentes para congelación de semen en nuestros laboratorios centrales, y los distribuimos a cada uno de nuestros Laboratorios Afiliados. Los diluyentes se producen bajo condiciones estrictamente controladas en lotes de gran volumen, son ampliamente evaluados y ajustados para asegurar que se mantenga la osmolaridad y pH adecuados. Hay muchas formas de congelar semen y otros laboratorios fuera de la red de SBS tienen sus propios métodos que utilizan distintos diluyentes y protocolos de procesamiento. SBS es la única compañía de congelación de semen equino que ha creado una red de laboratorios utilizando protocolos de congelación estandarizados bajo un control de calidad extensivo. Adicionalmente, todos los laboratorios de SBS usan los mismos métodos de análisis y determinación de calidad post-descongelación. Una vez que se realiza una prueba de congelación, los resultados se ponen a disposición y se utilizan en todos los demás Laboratorios Afiliados de SBS, los cuales están extensivamente distribuidos a lo largo de Estados Unidos, Centroamérica, Europa y Australia. Esto significa que llevando a su semental a cualquier Laboratorio Afiliado de SBS, puede esperar los mismos resultados de congelamiento que obtuvo con la prueba de congelación inicial.

• ¿Cuántas pruebas de congelación son necesarias para determinar el mejor protocolo para mi semental?

  Luego de realizar las colecciones de limpieza y evaluaciones necesarias, generalmente realizamos una prueba de congelación, evaluamos los resultados y determinamos si se justifica realizar una segunda prueba. Si los dos “mejores” protocolos arrojan resultados similares, en ocasiones optamos por dividir un segundo eyaculado en dos fracciones, para determinar si se concluye una preferencia significativa en la segunda comparación. Asimismo, si los resultados de la primera prueba son insatisfactorios y si el dueño está de acuerdo, podemos experimentar con técnicas alternativas para intentar mejorar los resultados. Algunos sementales con bajo nivel de espermatozoides no generan suficiente semen en un eyaculado para lograr dividirlo en cinco fracciones. En estos casos, podríamos requerir un segundo eyaculado para evaluar a profundidad nuestros cinco protocolos estándar.

• ¿Es necesario realizar una nueva prueba de congelación cada año?

  Normalmente no repetimos pruebas de congelación de un año al otro, a menos que tengamos un nuevo diluyente, o hayamos cambiado la formulación del diluyente desde la última estadía del semental para congelación. Según nuestra experiencia, la preferencia en procedimiento no cambia año con año en un semental determinado. Por otro lado, si han pasado varios años desde que congelamos semen de un caballo y este no está respondiendo a la congelación tan bien como en ocasiones previas, repetimos la prueba de congelación en caso de que hayan cambiado las características del semen.

• ¿Por qué optan por un congelador de células programable en lugar de congelar con vapor?

  El congelador programable ofrece una ventaja significativa al poder controlar de forma confiable la velocidad de enfriamiento con una precisión de 0.1 °C/minuto (enfriamiento activo). Esto nos permite diseñar protocolos de enfriamiento definidos y precisos que son consistentes y repetibles en cada congelación. Adicionalmente, se pueden incorporar dos o más velocidades de enfriamiento en un mismo protocolo de congelación. La congelación sobre vapor (enfriamiento pasivo) ofrece una capacidad muy limitada para ajustar la velocidad de enfriamiento y no permite la misma repetitividad.

• ¿Qué tamaño de pajillas utilizan y por qué?

  Usamos pajillas plásticas (cloruro de polivinilo) que contienen un volumen de 0.5 ml cada una. En el pasado, se utilizaban también macro tubos de 4 o 5 ml para empacar semen para congelación. En los últimos 10 años, SBS ha optado por la pajilla de 0.5 ml porque permite una velocidad de congelación más consistente dentro de la pajilla, puesto que el diámetro de la misma es considerablemente más pequeño que el del macro tubo. Cuando la velocidad de congelación de todo el semen dentro de la pajilla es consistente, la calidad general del semen se maximiza a la hora de descongelar e inseminar. Otro beneficio de utilizar pajillas de 0.5 ml es que permiten ser cargadas y selladas de forma mecánica, usando máquinas selladoras que permiten una carga consistente y un sellamiento seguro, reduciendo además el tiempo de procesamiento. Asimismo, las pajillas de 0.5 ml se prestan para distintos métodos de almacenamiento conveniente, ya sea en goblets pequeños o grandes, o en bastones. Además, la evaluación post-descongelación de una o dos pajillas de 0.5 ml de cada lote representa solo un octavo (1/8) o un cuarto (1/4) de una dosis inseminante.

• ¿Cómo se evalúa la calidad del semen congelado?

  Realizamos una evaluación post-descongelación de dos pajillas tomadas de cada eyaculado congelado. Una vez descongelado, el semen se cultiva para descartar la presencia de crecimiento bacteriano, y la motilidad espermática se evalúa visualmente y también utilizando un modelo CEROS de Hamilton-Thorne automático de análisis de motilidad. Este análisis de motilidad se realiza luego de diluir el semen e incubarlo a 37°C por 30 minutos. Un análisis computarizado de espermatozoides (Computer Assisted Sperm Analysis “CASA”) permite una evaluación objetiva de motilidad espermática y provee información sobre la motilidad progresiva y total, así como los parámetros de velocidad. No obstante lo anterior, es importante recordar que, aunque la motilidad es un indicador de relativa salud celular, la fertilización es un proceso complejo que requiere numerosos atributos funcionales tanto de los espermatozoides como del óvulo. Por lo tanto, la fertilidad real de este o cualquier semen congelado solo puede ser determinado a través de una inseminación debidamente sincronizada de yeguas con buena salud reproductiva.

• ¿Por qué utilizan dos pajillas de prueba y no sólo una?

  Utilizamos dos pajillas combinadas para evaluar la calidad post-descongelación con el fin de incrementar la posibilidad de que los resultados representen la calidad de todas las pajillas del eyaculado (a diferencia de evaluar una sola pajilla).

Expectativas sobre Semen Congelado

• ¿El semen congelado es menos fértil que el semen fresco o enfriado?

  La fertilidad del semen congelado depende en gran medida del semental. En uno de los pocos ensayos clínicos en que se ha evaluado la fertilidad de semen fresco, enfriado y congelado del mismo semental, se determinó que la fertilidad del semen enfriado fue menor a la del semen fresco, y la fertilidad del semen congelado fue ligeramente menor que la del semen enfriado. Sin embargo, en otros estudios basados en un gran número de inseminaciones, se encontró que la fertilidad del semen enfriado y congelado fue similar, y en ambos fue ligeramente menor que en el semen fresco. En el 2010, se realizó un estudio en tres criaderos en Maryland, Estados Unidos, administrando un combinado total de 36 sementales que enviaron semen enfriado o congelado a un total de 648 yeguas. El índice de preñez en el primer ciclo fue de 63% para semen enfriado y 60% para semen congelado. Al final de la temporada reproductiva, el índice de preñez fue de 79% para semen enfriado y 76% para semen congelado. Lo anterior demostró que se pueden obtener resultados comparables con semen enfriado y congelado en la población general de un criadero.

• ¿Qué índice de fertilidad debería esperar del semen congelado?

  En general, si un semental tiene semen de calidad comercialmente aceptable, la fertilidad debe ser de 50-55% de preñez en el primero ciclo, y 70-80% de preñez a finalizar la temporada reproductiva. Sin embargo, la fertilidad del semen congelado –al igual que el semen fresco y enfriado– depende en gran medida del semental.

• ¿Existe una correlación entre motilidad post-descongelación y fertilidad?

  La fertilidad es inherente a cada semental como individuo, mientras que la motilidad es solo un atributo de la función espermática. La fertilización es un proceso completo que requiere numerosos atributos funcionales tanto de los espermatozoides como del óvulo. Por ende, la verdadera fertilidad de cualquier semen –fresco, enfriado o congelado– solo puede ser determinada mediante una inseminación correctamente sincronizada en una yegua en buen estado de salud reproductiva. No obstante, la motilidad de los espermatozoides es uno de los mejores indicadores que tenemos para predecir el éxito de un programa reproductivo. Si la motilidad post-descongelación es muy baja (10-20%), es muy probable que la fertilidad sea baja. Sin embargo, la fertilidad no necesariamente mejora incrementando la motilidad; un semental con una motilidad progresiva post-descongelación de 35% puede ser igual de fértil que uno con una motilidad progresiva de 55%.

• ¿Se puede preñar una yegua con semen con motilidad progresiva inferior al 30%?

  Sí. A pesar de que el corte recomendado para comercializar semen congelado es de 30%, al igual que con semen fresco o enfriado, algunos sementales pueden obtener una fertilidad aceptable con un semen con motilidad inferior al 30%, siempre que haya suficientes espermatozoides funcionalmente viables en la dosis inseminante. La motilidad post-descongelación es un buen indicador de qué tan bien soportó el semen el estrés de ser congelado y descongelado, y por ende se recomienda ser precavido al usar semen congelado con una motilidad post-descongelación menor a la aceptable. Una reducción significativa en la motilidad progresiva post-descongelación indica que hubo daño en los espermatozoides y podría incluso haber daño sub-letal en espermatozoides que mantienen motilidad, lo cual podría reducir la fertilidad. Es importante recordar que la evaluación de motilidad post-descongelación puede variar

Inseminando Yeguas con Semen Congelado

• ¿Mi yegua es muy vieja para ser inseminada con semen congelado?

  Las yeguas mayores y yeguas “problema”, tienen menores índices de preñez con inseminación con semen congelado en comparación con la inseminación artificial con semen fresco. Según información recolectada de un gran número de yeguas, el índice de preñez por ciclo se redujo en yeguas de 16 años o más (un 54% en yeguas menores de 16 años, en comparación con un 42% en yeguas de 16 años o más). El depósito de semen en el útero, ya sea con monta natural o inseminación artificial, genera una fuerte reacción inflamatoria. Esto es un proceso natural diseñado para remover del útero el exceso de espermatozoides, plasma seminal y contaminantes. Las yeguas mayores son menos eficientes en combatir este proceso natural inflamatorio después de la inseminación. La inflamación uterina 5 días después de la fertilización es incompatible con la supervivencia del embrión. En yeguas mayores, el riesgo de desarrollar una persistente reacción inflamatoria después del depósito de semen requiere un manejo especial. Entre las estrategias de tratamiento para esta población de yeguas está la corrección de defectos anatómicos en el tracto reproductivo, limitación de exposición uterina a semen y bacterias y la limpieza de útero para eliminar contaminantes y productos de la inflamación. Idealmente, en estas yeguas se debe utilizar únicamente semen con buena fertilidad.

• ¿Debería descartar el uso de semen congelado si la yegua es donadora para transferencia embrionaria?

  El uso de semen congelado no está contraindicado para su uso en yeguas donadoras en transferencias de embriones. Cuando se utilice semen congelado en yeguas donadoras, se debe tomar en consideración que la fertilización del óvulo puede ocurrir después de la ovulación, dependiendo del protocolo de inseminación que se esté utilizando. Tomando eso en cuenta, la programación del lavado para recuperar el embrión debería realizarse a los ocho días post-ovulación, en lugar de siete días, para asegurarse de que el embrión ha migrado al útero y pueda ser recuperado exitosamente.

• Mi veterinario dice que las yeguas deben ser inseminadas con semen congelado a la mitad de la noche porque el semen no sobrevive mucho tiempo después de la descongelación. ¿Es esto cierto?

  En cuanto a la longevidad del semen, quizás. En cuanto a la inseminación a la mitad de la noche, NO es cierto.

  Es una creencia común de muchos veterinarios y criadores que la vida útil del semen congelado dentro del tracto reproductivo de la yegua es menor en comparación con el semen fresco. No obstante, no se han realizado pruebas experimentales de fertilidad para determinar si eso es cierto. Ciertamente, el tipo de daño que puede sufrir las membranas de los espermatozoides durante el proceso de congelación y descongelación teóricamente pueden reducir la longevidad del semen, y hay evidencia in-vitro de que el semen descongelado no se adhiere tan bien al epitelio ovárico como el semen fresco. Por lo tanto, generalmente se considera que el tiempo óptimo para inseminación con semen congelado es en un periodo de 12 horas antes y hasta 6 horas después de la ovulación.

  Tradicionalmente, el semen congelado se vende por dosis, lo cual genera bastante presión para el veterinario de utilizar solo una dosis por ciclo. La forma más confiable de usar una dosis es inseminar post-ovulación. Las inseminaciones post-ovulación deben realizarse entre 6 y 8 horas después de la ovulación, debido al periodo de vida del óvulo en el oviducto. Lógicamente, mientras más cercana sea la inseminación a la ovulación, mejores serán los resultados, ya sea con semen congelado o con semen fresco. Por ende, este método generalmente requiere chequear a la yegua en intervalos de 6 horas para determinar si se ovuló. Esto puede significar que la yegua tenga que revisarse a la mitad de la noche. Sin embargo, es falso que el semen congelado tenga una longevidad de sólo seis horas.

  En SBS recomendamos a los propietarios de los sementales entregar al menos dos dosis por ciclo a los dueños de las yeguas. Hemos desarrollado un simple y eficiente protocolo para el manejo de yeguas sujetas a inseminación con semen congelado. El protocolo incluye una única examinación diaria hasta que se detecte un folículo pre-ovulatorio de 35mm. Se administra un agente ovulatorio (puede ser HCG o Deslorelina), y se insemina con dos dosis de semen: una 24 horas después de administrado el agente ovulatorio y otra 40 horas después de administrado. El uso de este protocolo asegura que haya espermatozoides viables para fertilización en el tracto reproductivo de la yegua durante el período comprendido entre 12 horas antes a 6 horas después de la ovulación, para yeguas que ovulen entre 18 y 52 horas después de inyectado el HCG o la Deslorelina. Este protocolo no requiere chequeo ni inseminación de la yegua a la mitad de la noche.

• ¿Inseminar con una dosis justo en la ovulación brinda mejor fertilidad que inseminar con dos dosis?

  SBS ha desarrollado un simple y eficiente protocolo para el manejo de yeguas sujetas a inseminación con semen congelado. El protocolo incluye una única examinación diaria hasta que se detecte un folículo pre-ovulatorio de 35mm. Se administra un agente ovulatorio (puede ser HCG o Deslorelina), y se insemina con dos dosis de semen: una 24 horas después de administrado el agente ovulatorio y otra 40 horas después de administrado. El uso de este protocolo asegura que haya espermatozoides viables para fertilización en el tracto reproductivo de la yegua durante el período comprendido entre 12 horas antes a 6 horas después de la ovulación, para yeguas que ovulen entre 18 y 52 horas después de inyectado el HCG o la Deslorelina. Según estudios realizados en Italia y Colorado, así como evidencia de nuestro propio programa de distribución comercial, son muy similares los índices de preñez de yeguas inseminadas con nuestro protocolo y de yeguas inseminadas con una única dosis dentro de las seis horas posteriores a la ovulación. Los propietarios de yeguas pueden alcanzar excelentes resultados con semen congelado y minimizar los costos de manejo reproductivo al comprar semen congelado en paquetes de dos dosis por ciclo. En SBS aconsejamos a los dueños de sementales que entreguen suficientes dosis por ciclo para utilizar este protocolo.

• ¿Inseminar con dos dosis genera más acumulación de fluidos post-inseminación, y por ende menor fertilidad?

  Existen numerosos reportes sobre protocolos de inseminación sincronizada que demuestran que las inseminaciones múltiples en yeguas normales no son dañinas. La inseminación con semen descongelado dos veces por ciclo no incrementa la incidencia de acumulación de fluidos ni endometritis post-inseminación. Asimismo, varios estudios a gran escala indican que múltiples inseminaciones en un ciclo (con semen congelado o fresco) resultan en mayores índices de preñez, presuntamente porque se reduce el intervalo entre inseminación y ovulación.
  Todas las yeguas experimentan una inflamación natural en el útero una vez depositado el semen. En yeguas con buena salud reproductiva, esta inflamación desaparece a las 12 horas de la primera inseminación. Por lo tanto, se puede realizar de forma segura una segunda inseminación en las siguientes 24 horas, sin afectar negativamente la fertilidad de la yegua. Algunas yeguas problema parecen ser menos eficientes en limpiar el lumen del útero y los productos inflamatorios acumulados después de la inseminación. La fertilidad se reduce en este tipo de yeguas y, a menos de que se trate adecuadamente, la condición puede agravarse con inseminaciones posteriores. Las yeguas con esta condición deben ser inseminadas una única vez por ciclo, ya que varias inseminaciones (con semen fresco o congelado) pueden resultar en una acumulación de fluido post-inseminación y un índice menor de preñez.

• ¿Es cierto que algunas yeguas son más propensas a contraer una infección cuando se inseminan con semen congelado?

  La vieja teoría era que cuando se usa semen congelado, las yeguas acumulan más fluido en el útero, lo cual hace a la gente pensar en un proceso infeccioso. Recientemente se han realizado estudios en esta área para explicar por qué las personas ven más cantidad de fluido post-inseminación. La conclusión es que las personas revisen a las yeguas más seguido cuando usan semen congelado, por ende dando menos tiempo para que el útero elimine el fluido. Esta acumulación temporal de fluido es una reacción natural del útero en respuesta a la presencia de espermatozoides y puede verse post-inseminación ya sea con semen fresco o congelado. Por esta razón, la reacción debe considerarse una respuesta inflamatoria, en lugar de una verdadera infección, ya que son situaciones distintas. Otro punto a considerar es que el plasma seminal limita la respuesta inflamatoria del útero cuando entra en contacto con las células espermáticas. Muchas personas tratan de eliminar por completo esta porción del eyaculado cuando procesan el semen para congelación. Con el protocolo que usamos en SBS, no se elimina por completo el plasma seminal del eyaculado.

• ¿Hay yeguas alérgicas a los diluyentes que se usan para congelar semen?

  La respuesta inflamatoria del útero a la presencia de semen y del diluyente es una respuesta antigénica normal a las mismas células espermáticas. La introducción de células espermáticas lavadas y separadas suspendidas en solución salina estéril causa la misma reacción. La persistencia de este fluido inflamatorio puede deberse a la ausencia de plasma seminal en semen congelado o a un proceso de limpieza retrasado en yeguas más viejas o yeguas con endometritis persistente. Sin embargo, debemos tener en cuenta que, aunque es poco común, cualquier fluido proteínico externo tiene el potencial de causar una reacción alérgica en una yegua particular.

• ¿El uso de semen congelado aumenta las posibilidades de una pérdida del embrión?

  Es bien sabido que la muerte embrionaria es una causa sustancial de pérdida económica en la industria de reproducción equina. La incidencia de pérdida embrionaria durante los primeros 14-50 días de gestación varía entre 5% y 24% cuando se usa semen fresco o monta natural. Existe una cantidad limitada de información sobre la incidencia de pérdida embrionaria en yeguas inseminadas con semen congelado.
  Los médicos investigadores Barbacini y otros recolectaron información de 464 yeguas Warmblood inseminadas con semen congelado entre 6 horas antes y 6 horas después de la ovulación, y encontraron que el índice de pérdida embrionaria fue de 8.9% entre los días de gestación 14 y 50. Entre los grupos de yeguas inseminadas pre-ovluación y post-ovulación no se reportó una diferencia significativa de pérdida embrionaria (8.1% y 9.3%, respectivamente), lo cual demuestra que la incidencia de pérdida embrionaria no se ve afectada por la inseminación de las yeguas en ningún momento del período periovulatorio. Los autores también analizaron la información subdividiendo a las yeguas en grupos reproductivos y por edad. El grupo de yeguas problema tuvo mayor pérdida embrionaria (14.6%) que el de yeguas que nunca han tenido cría (5.3%) y el de yeguas con cría (7.8%), y esto probablemente está relacionado con el hecho de que la mayoría de yeguas subfértiles se concentraron en el primer grupo. Este estudio retrospectivo también demostró que las yeguas mayores de 16 años tuvieron una mayor (15.6%) incidencia de muerte embrionaria que las yeguas más jóvenes (8.2%): esto probablemente está asociado con el ambiente uterino anormal en yeguas mayores.

• ¿Usando semen congelado, es mejor usar una pipeta de inseminación profunda?

  Cuando se usa una dosis estándar de semen congelado con 800 millones de espermatozoides, no es necesario usar la pipeta de inseminación profunda. En este caso, depositar el semen en el cuerpo uterino o más profundamente en el mismo no tendrá incidencia en la fertilidad. Sin embargo, si se usa una dosis menor de semen congelado, particularmente por debajo de los 100 millones, lo más recomendable es utilizar la pipeta de inseminación profunda.

• ¿Se pueden utilizar menos pajillas si se utiliza la pipeta de inseminación profunda?

  Quizás. La inseminación profunda puede permitir utilizar una dosis mucho más baja de semen descongelado. Si se tiene un semental muy fértil y semen de buena calidad, ciertamente es posible usar menos semen utilizando la pipeta de inseminación profunda. Sin embargo, se debe tener conocimiento de la fertilidad del semental antes de reducir el número de espermatozoides a introducir.

Pruebas sanitarias y consideraciones sobre patologías

• ¿Debo realizar pruebas sanitarias a mi semental antes de entrar a sus instalaciones?

  Para colecciones realizadas en la Unión Europea

  El semen debe ser recolectado y congelado en un centro de colección aprobado bajo normas específicas de cuarentena y salud dictadas por el Estado miembro de la UE.

  Se requieren las siguientes pruebas sanitarias:

  - Anemia Infecciosa Equina (AIE)

  - Arteritis Viral Equina (AVE)

  - Metritis Contagiosa Equina (MCE); dos juegos de 4 muestras (uretra, fosa uretral, prepucio y semen/fluido pre-eyaculatorio) con 7 días de espacio

  Adicionalmente, algunos Laboratorios Afiliados en la UE requieren pruebas de muermo, durina, y Herpesvirus Equino.

  Hay tres opciones para producir semen congelado en la UE.

  1.) El semental debe ser un residente por treinta días antes de comenzar la sesión de congelación de semen. En este caso el semental se sujeta a pruebas sanitarias en los 30 días siguientes a entrar a centro de colección y en no menos de 14 días después de entrar al centro de colección. Para los sementales que son residentes continuos de las instalaciones aprobadas, todos las pruebas mencionadas deben ser realizadas al menos una vez al año, al inicio de cada temporada reproductiva.

  2.) Los sementales residentes (como la situación #1) pueden ser trasladados dentro y fuera del centro de colección (hasta un máximo de 14 días fuera), pero deben realizarse pruebas adicionales en intervalos fijos durante el periodo de congelación de semen (e.g., AIE cada 90 días, AVE cada 30 días y MCEs cada 60 días).

  3.) Los sementales no residentes pueden ser trasladados dentro y fuera del centro de colección. Las pruebas sanitarias deben realizarse previo a su entrada al centro y deben ser repetidas entre 14 y 90 días después de completar la sesión de congelación.

  Cada país miembro de la UE selecciona qué regla seguir. Italia y Alemania siguen la regla número 1, tanto para producción de semen doméstica como para exportación. Suecia permite que el médico escoja la regla cuando se congele semen para exportación. Para semen de uso doméstico, Suecia requiere que las pruebas de AVE y MCE se realicen antes de que el semental ingrese a las instalaciones, y el centro de colección no puede congelar semen para exportación mientras haya un semental dentro de las instalaciones congelándose para uso doméstico. Irlanda permite escoger entre la regla 1 o 2.

  Para sementales colectados en Norteamérica

  A diferencia de la UE, a menos que el semen que se esté congelando sea para exportación, no existen pruebas sanitarias obligatorias establecidas por el gobierno ni por una entidad de regulación veterinaria en Estados Unidos. Asimismo, no hay requerimiento de que el semen sea colectado o procesado en instalaciones inspeccionadas o aprobadas por ninguna entidad de gobierno ni de regulación veterinaria. Con el fin de proveer un alto estándar de calidad en producción y distribución desde los laboratorios SBS, hemos establecido una política de pruebas sanitaria para todos los sementales que ingresan a nuestros laboratorios. A pesar de que pueden existir algunas variaciones en los requerimientos entre cada Laboratorio Afiliado, todos los sementales son sujetos a las siguientes pruebas:

  - Anemia Infecciosa Equina (AIE) entre 6-12 meses de su llegada

  - Arteritis Viral Equina (AVE) entre los primeros 30 días después de su llegada

  Adicionalmente, muchos Laboratorios Afiliados SBS requieren también que los sementales obtengan resultados negativos de las pruebas de Estomatitis Vesicular (EV) y Metritis Contagiosa Equina (MCE).

  En el caso de la congelación de semen para exportación, se requiere un calendario de pruebas similar al descrito para la Unión Europea, dependiendo de los requerimientos del país de importación.

  Para sementales colectados en Australia

  Al igual que en Estados Unidos, en Australia no hay pruebas sanitarias obligatorias para colección y congelación de semen para uso doméstico. Australia es reconocida por ser libre de MCE y no se han reportado casos de AVE. Para la congelación de semen para exportación el semen debe ser colectado y procesado en un centro de colección aprobado y deben realizarse las pruebas sanitarias según requiera el país de importación.

  Nota: Los requerimientos sanitarios incluidos en este documento se exponen como guías de carácter general y pueden cambiar con el tiempo, a partir de nuevas regulaciones gubernamentales, brotes de enfermedades y cambios en la política de SBS. Consulte siempre con su Laboratorio Afiliado para determinar requerimientos específicos.

• Mi semental es seropositivo de Arteritis Viral Equina. ¿Puedo congelarle semen?

  Sí, aun así puede congelar semen de su caballo. Si su semental es seropositivo esto significa que tiene circulando a anticuerpos contra la arteritis vital equina, ya sea por exposición natural previa o por vacunación. Con una prueba de sangre no se puede distinguir entre anticuerpos generados por el verdadero virus y los generados como resultado de la vacuna. Aun si su caballo es seropositivo por verdadera exposición al virus, podría no haber retenido el virus en un tracto reproductivo (no todos los sementales no retienen). Lo importante es determinar si su caballo es un portador del virus realmente propagando virus en su semen. Esto puede verificarse enviando muestras del semen a un laboratorio reconocido para una prueba de aislamiento del virus en el semen de dos eyaculados distintos. Si el semen sale negativo para el virus, el semental no es portador y puede inseminar yeguas sin restricción ni precauciones adicionales. Si es portador y está activamente propagando el virus, igualmente se puede congelar y usar para inseminar yeguas, pero deben tomarse ciertas precauciones (ver siguiente pregunta para más información).

• Mi semental es portador-propagador de Arteritis Viral Equina. ¿Puedo congelarle semen?

  Estados Unidos

  Sí, puede congelar el semen de su caballo y, de hecho, la fertilidad no parece verse afectada. Sin embargo, debe tomar algunas precauciones. El virus de la arteritis sobrevivirá bastante bien en semen enfriado y congelado, y debe ser almacenado en tanques de nitrógeno líquido separados. Debe realizarse una declaración del estatus de AVE del semental a los propietarios de yeguas para que tomen las medidas de precaución necesarias para proteger a sus yeguas de contraer el virus. Solo yeguas que tengan los anticuerpos para combatir la AVE, ya sea por vacunación o por exposición previa, pueden ser inseminadas con el semen que tiene el virus. Asimismo, si envía semen con el virus de AVE a ciertos estados dentro de Estados Unidos (Utah, Montana y Washington) debe obtener un permiso especial de importación del Departamento Estatal de Agricultura. Tome en cuenta que el semen AVE positivo no podrá ser exportado. Adicionalmente, verifique con su laboratorio afiliado local, ya que muchas instalaciones no permiten que haya sementales portadores-propagadores de AVE en su propiedad.

  Unión Europea

  Los sementales que propagan el virus de AVE no tienen permitido ingresar a Centros Aprobados de Colección en la Unión Europea.

  Es posible que un semental AVE positivo sea colectado en un centro no-aprobado de colección, dependiendo de los requerimientos del país específico. Por ejemplo, un semental AVE positivo puede ser colectado en un centro no-aprobado de colección en Suecia. Si, semen fresco o enfriado puede ser utilizado para inseminar yeguas, siempre y cuando el propietario de las yeguas esté al tanto de su estatus de AVE y haya tomado las precauciones necesarias. Sin embargo, aun en Suecia, el semen de un caballo AVE positivo no puede ser congelado.

Preguntas Generales sobre Semen Congelado

• ¿Por cuánto tiempo se preserva el semen congelado?

  Siempre y cuando el semen no se descongele y se mantenga de forma adecuada en un tanque de nitrógeno líquido, se cree que su vida productiva es casi ilimitada. En SBS hemos generado preñeces con semen almacenado por más de 20 años. SBS maximiza la supervivencia del semen utilizando la más alta calidad de diluyentes disponible, congeladores de células computarizados y programables, y manteniendo condiciones rigurosamente controladas en los tanques de almacenamiento.

• ¿Cuál es la motilidad post-descongelación mínima recomendada?

  SBS recomienda que el semen para comercialización contenga más de 200 millones de espermatozoides con motilidad progresiva post-descongelación del 30%. Medimos la motilidad post-descongelación usando un analizador de semen computarizado cuando la muestra es descongelada e incubada a 37° por 30 minutos.

• ¿Puede variar la motilidad post-descongelación según el laboratorio que realice el análisis?

  Sí, esto es una inquietud válida. La motilidad post-descongelación puede variar dependiendo de:

  - El método de análisis

  - El tiempo y temperatura de incubación

  - El diluyente utilizado

  Método de análisis:

  En SBS medimos la motilidad post-descongelación de forma objetiva utilizando un analizador de semen computarizado (CASA). Los médicos sin un sistema CASA determinan la motilidad visualmente mediante la observación con un microscopio, estimando la motilidad porcentual. Este método está sujeto a la parcialidad del observador y tiene poca consistencia en aplicación y precisión entre técnicos. Sin embargo, aun con el CASA es posible introducir un sesgo, por ejemplo, en la selección de campos y en la configuración del CASA. En nuestro sistema CASA, la motilidad progresiva se define como la que tenga una velocidad promedio de más de 50 micrómetros por segundo y que se esté moviendo con un valor de rectitud de más del 75%. Ya que los umbrales de Motilidad Progresiva los establece cada usuario, es importante entender que el médico o técnico puede incrementar el porcentaje de motilidad progresiva bajando los umbrales de inclusión. Esto también significa que dos medidas de motilidad realizadas con un CASA no pueden ser comparadas si las máquinas no operan con la misma exacta configuración.

  Tiempo y temperatura de incubación:

  En SBS realizamos la prueba de motilidad post-descongelación después de incubar el semen a 37°C por 30 minutos. Esta es una prueba de estrés al semen congelado que puede revelar daño latente en los espermatozoides que podría no ser evidente inmediatamente después de ser descongelado. Algunos médicos verifican la motilidad inmediatamente post-descongelación. Este valor puede ser más alto que el de una muestra evaluada 30 minutos después y no brinda ninguna indicación de la longevidad del semen. La temperatura es igualmente importante. La motilidad del semen se evalúa mejor en 37°C, simulando la temperatura dentro del tracto reproductivo de la yegua. En SBS pre-calentamos los tubos, diluyente y portaobjetos usados en el análisis post-descongelación y evaluamos la motilidad con una plataforma microscópica caliente. El semen analizado a temperatura ambiente generalmente muestra una velocidad reducida en comparación con muestras evaluadas a 37°C.

  Diluyente utilizado:

  Para lograr un análisis CASA preciso, el semen congelado debe ser diluido después de descongelado, para obtener una concentración de células apropiada. Ya que existe preferencia de diluyentes entre sementales, y la motilidad del semen varía entre diluyentes, el diluyente utilizado en la descongelación puede afectar la motilidad post-descongelación. En SBS diluimos el semen congelado con el mismo diluyente que se utilizó en la centrífuga del procesamiento inicial para congelación.

• ¿Qué debería hacer si tengo semen congelado que no cumple los estándares de calidad para comercialización?

  En SBS no recomendamos la distribución comercial de semen con una motilidad progresiva post-descongelación menor a 30%. Una opción es destruir las dosis que no alcancen esta calidad comercial. Como alternativa, algunos de nuestros clientes usan semen con motilidad progresiva entre 20-30% para inseminar a sus propias yeguas, ajustando el número de pajillas/dosis para alcanzar el mínimo de 200 millones de espermatozoides con motilidad progresiva por dosis. No hay garantía de que ajustando el número de espermatozoides por dosis haya una fertilidad comparable a la del semen con calidad comercial, ya que esto depende de si la baja motilidad es causada por defectos compensables o no compensables en los espermatozoides.

• ¿Qué puedo hacer si tengo semen de calidad desconocida?

  Puede enviar 1-2 pajillas a SBS y nosotros realizamos el análisis post-descongelación, incluyendo concentración espermática, motilidad y cultivo bacteriano. De esta forma, usted puede saber cuántos espermatozoides con motilidad progresiva tiene cada pajilla y ajustar el número de pajillas por dosis para asegurar la mejor probabilidad de concepción. En especial, recomendamos hacer esto con semen importado comprado por dosis.

• ¿Qué opciones tengo para comprar semen congelado?

  Hay tres preguntas que los propietarios de yeguas deben plantearse antes de comprar semen congelado:

  - ¿Local o internacional?

  - ¿Por dosis o por contrato?

   - ¿Quién dio o dará el servicio de congelación?

  Hay ventajas significativas que debe considerar sobre usar SBS como su proveedor de semen congelado.

  Local o internacional:

  Una ventaja del semen congelado es que puede comprar de cualquier parte del mundo. Por ende, su primera decisión es si desea comprar semen localmente o internacionalmente. El semen congelado se puede enviar a cualquier parte del mundo, siempre y cuando se congele con los requerimientos sanitarios requeridos por el país importador. También es posible que haya agentes en su país que hayan importado semen desde afuera y lo tengan disponible localmente.
  En general, la compra y envío de semen congelado localmente es más viable que un envío internacional, sin embargo, este no es siempre el caso: en realidad depende del valor del potro. Por otra parte, si busca comprar más de un par de dosis de un semental internacional, podría ser más económico importar directamente del dueño, en lugar de comprar el mismo semen con un agente local.

  Con nuestra Red Internacional de Laboratorios Afiliados, SBS está perfectamente posicionado para asistirle en la importación de semen de cualquier país. En nuestra Guía de Sementales, el perfil de cada semental indica si el semental en particular tiene semen de calidad de exportación disponible y para qué países. También tenemos una lista de caballos Cuarto de Milla disponibles para Europa y Australia aquí.

  Por dosis o por contrato:

  Tradicionalmente, el semen congelado se vende por dosis, sin garantía de potro vivo. En nuestra opinión, si usted usualmente brinda garantía de “potro vivo” o “servicio de compensación” con semen enfriado, también debería dar la misma garantía con semen congelado. Consideramos que este es el sistema más justo para ambas partes. La venta de semen por dosis promueve que los propietarios de yeguas traten de minimizar el número de dosis utilizadas (compradas) para que la preñez se produzca al menor costo. Este enfoque genera costos veterinarios mucho más altos por el manejo reproductivo y la inseminación de la yegua, y puede resultar en una menor fertilidad en el intento de conservar dosis de semen. Por lo tanto, en SBS recomendamos a nuestros clientes propietarios de sementales que vendan el semen congelado mediante contrato con garantía de potro vivo, al igual que como lo harían con semen enfriado, y sugerimos que entreguen al menos dos dosis por ciclo para que las yeguas puedan ser administradas con un protocolo eficiente de inseminación sincronizada.

  Ver también: Contract Considerations for Exporting Semen

  Proveedor del servicio de congelación:

  Es importante tomar en consideración que no todo el semen congelado se produce de la misma forma. En Estados Unidos no hay estándares obligatorios para la producción de semen congelado. Esto, aunado a que el análisis post-descongelación puede variar muchísimo, significa que hay una inherente falta de control de calidad en la industria del semen congelado. Asimismo, puesto que el semen congelado generalmente se vende por dosis, los agentes tienen la presión financiera de conseguir la mayor cantidad de dosis inseminantes con el semen que tienen disponible. En consecuencia, a veces disminuyen el número de pajillas por dosis, comprometiendo la fertilidad del semen. En SBS estamos dedicados a mejorar los estándares de control de calidad de la industria de semen congelado equino, y a promover el uso de semen congelado mediante educación y producción de producto de calidad.

  Adicionalmente, el programa de distribución es una consideración importante a la hora de buscar proveedores de semen congelado. No hay nada más frustrante que invertir su dinero en semen congelado y luego descubrir que el proveedor solo tiene 1 o 2 tanques de nitrógeno, y cuando llama a pedir un envío ambos tanques están ocupados y debe esperar dos semanas para que regresen. En SBS nos aseguramos de que el proceso de envío sea lo más conveniente y rentable posible, y libre de inconvenientes para nuestros clientes.

  Ventajas de usar SBS como proveedor de semen congelado:

  - Tenemos un control de calidad pionero a través de nuestra Red de Laboratorios Afiliados

  - Con nuestra Red Internacional de Laboratorios Afiliados, SBS está perfectamente posicionado para asistirle con la importación de semen desde cualquier parte del mundo

  - Mantenemos un mínimo recomendado de motilidad progresiva de 30% y 200 millones de espermatozoides con motilidad progresiva por dosis. 

  - Recomendamos a nuestros clientes propietarios de sementales que vendan su semen congelado con un contrato de reproducción con una garantía de potro vivo, y que entreguen un mínimo de dos dosis por ciclo a los propietarios de yeguas. 

  - Tenemos un programa de distribución para envíos de semen congelado sin precedentes, diseñado a la conveniencia de los clientes propietarios de yeguas.

  Puede ver algunos de los sementales disponibles con semen congelado por SBS en nuestra Guía de Sementales.

• ¿Qué debería tomar en cuenta si estoy pensando comprar semen de otro país?

  - ¿El semen está calificado para exportación?

  - ¿Qué calidad tiene el semen?

  ¿El semen está calificado para exportación?

  Para calificar para exportación, el semen debe ser congelado en un centro de colección aprobado, y el semental debe cumplir las pruebas sanitarias requeridas por el país de importación. Las regulaciones y requerimientos para exportación/importación de semen congelado varían según los países involucrados. Para adquirir semen de otro país debe aplicar para un permiso de importación, emitido por su ministerio de agricultura.

  Con nuestra Red Internacional de Laboratorios Afiliados, SBS está perfectamente posicionado para asistirle en la importación de semen de cualquier país. En nuestra Guía de Sementales, el perfil de cada semental indica si el semental en particular tiene semen de calidad de exportación disponible y para qué países. También tenemos una lista de caballos Cuarto de Milla disponibles para Europa y Australia aquí.

• ¿Qué calidad tiene el semen?

  Es importante conseguir toda la información posible sobre el semen congelado –¿han resultado ya preñeces usando este semen congelado? ¿cuál es el índice de preñez por ciclo o por temporada? ¿cuál es la motilidad post-descongelación y cómo fue evaluada? ¿cuál es la concentración de espermatozoides y cuántas pajillas vienen por dosis? Cada dosis de semen debe tener al menos un 30% de motilidad progresiva post-descongelación y contener un mínimo de 200 millones de espermatozoides con motilidad progresiva por dosis.
  No obstante, el análisis del semen puede variar entre técnicos. Si puede inquietudes sore el semen congelado le recomendamos que lo analice en un laboratorio independiente, idealmente antes de realizar la inversión en un lote de semen y los costos de importación asociados. Nuestros afiliados en Europa, Norteamérica, Centroamérica y Australia lo pueden asistir con la importación y análisis del semen.

Almacenamiento y Distribución

• ¿Cómo se almacena el semen congelado?

  El semen congelado debe ser almacenado adecuadamente para retener la máxima fertilidad. Se utilizan contenedores criogénicos especiales (tanques de nitrógeno líquido), diseñados para mantener temperaturas menores a -197°C (-320°F). Una vez finalizado el proceso de congelación, las pajillas de semen congelado se ponen en unos recipientes de plástico llamados goblets. Los goblets pequeños con espacio para 4 o 5 pajillas se pueden adherir a un recipiente metálico y colocarse en una canasta metálica con un compartimento designado dentro del tanque de nitrógeno. El nitrógeno se debe mantener sobre cierto nivel para lograr conservar la estabilidad de la temperatura de almacenamiento. En SBS medimos y registramos los niveles de líquido de cada uno de los tanques una vez a la semana. Siempre tenemos disponibles grandes volúmenes de nitrógeno en tanques presurizados (de 180 a 10.000 litros) para rellenar los contenedores de semen congelado según sea necesario.

• ¿Si congelo semen, SBS se puede encargar de almacenarlo y distribuirlo?

  Sí. En SBS tenemos el inventario de semen congelado equino más grande del mundo. Nuestros 25 laboratorios afiliados mantienen instalaciones de almacenamiento seguras. Nuestros laboratorios en Texas y Maryland almacenan más de 35.000 dosis cada uno. En SBS almacenamos el semen en tanques criogénicos de nitrógeno líquido que mantienen el semen en temperaturas de -197°, lo cual es crítico para su viabilidad a largo plazo.
  Nuestro programa de distribución ha sido diseñado para hacer envíos de semen congelado de forma rentable y sin complicaciones. En el momento en que un cliente propietario de un semental vende el semen, este envía una autorización al centro de almacenamiento con los datos de contacto del comprador (propietario de las yegua) y los veterinarios, así como otras instrucciones específicas como el número de dosis a entregar, etc. Una vez que recibimos la autorización, en SBS nos encargamos del resto. Se envía un formulario de solicitud de envío al comprador o al veterinario que ve la yegua. Cuando la yegua está por entrar en celo, el formulario se envía al centro de almacenamiento y las dosis de semen se empacan y envían inmediatamente en servicio de prioridad, junto con instrucciones ilustradas para su descongelación y manejo, e instrucciones para la inseminación.

  En SBS mantenemos un gran inventario de contenedores de vapor de nitrógeno o contenedores “secos”, que se usan para transportar el semen y mantienen las temperaturas de nitrógeno líquido por un periodo de 2 a 3 semanas. El semen se puede enviar por adelantado si es necesario para la inseminación y entregar en un contenedor de almacenamiento (si hay disponibles), o el veterinario puede usar el contenedor de envío para mantener el semen durante el ciclo de las yeguas, de forma tal que lo tenga a mano en el momento en que la yegua debe ser inseminada.

• Si almaceno semen en sus instalaciones, ¿está asegurado en caso de que el tanque se dañe?

  Esto varía entre laboratorios afiliados. Sin embargo, muchos laboratorios tienen seguros que cubren el costo del semen, es decir, el monto real pagado para tener el semen congelado. Si usted quisiera asegurar el valor del semen por un monto mayor, es necesario que adquiera un seguro adicional por su cuenta. Le recomendamos hacer la consulta directamente con su laboratorio SBS afiliado.

• ¿Cómo puedo solicitar una orden de semen congelado de SBS?

  El protocolo de solicitud puede variar entre laboratorios SBS afiliados, por lo tanto, le recomendamos que consulte con el Laboratorio Afiliado SBS responsable del almacenamiento y envío del semen del semental que le interesa, con el fin de obtener todos los detalles de solicitud y envío. No obstante, todos los laboratorios SBS operamos con los mismos principios generales. SBS no es un agente o “corredor” de semen congelado, por lo cual las consultas sobre la adquisición de semen congelado de un caballo específico debe realizarlas directamente al dueño del semental. Una vez que el dueño haya preparado un contrato de servicio con el comprador, ellos nos contactarán para autorizar la entrega del semen congelado. No hacemos envíos de semen congelado si no contamos con una autorización del dueño del semental. Cuando el propietario de la yegua está listo para el semen congelado, él llama al laboratorio afiliado de SBS para solicitar el envío. En la mayoría de los casos, el semen se puede enviar el mismo día siempre y cuando la solicitud se realice antes de las 12 mediodía. El semen se envía en contenedores “secos” con servicio de prioridad de FedEx. El alquiler del contenedor se realiza por entre 7 a 10 días hábiles, dependiendo del laboratorio.

• ¿Cómo envían el semen congelado?

  El semen congelado se envía en contenedores de vapor, o “contenedores secos”. Estos tanques básicamente lo que hacen es absorber el nitrógeno líquido en sus paredes. Los tanques se llenan de nitrógeno líquido, es decir, se “cargan” antes de su uso. Una vez que están completamente llenos, el líquido se saca del contenedor y este puede mantener la temperatura por 2-3 semanas. Los tanques se pueden enviar como material no peligroso porque no contienen nitrógeno líquido.

• ¿Los envíos de semen congelado están asegurados?

  Nosotros enviamos el semen congelado con Federal Express Overnight (algunos laboratorios pueden también hacer envíos “same-day” con una aerolínea). Con el envío se realiza un pago de $800-$1000 que cubre el costo de reemplazar el contenedor si se daña o pierde en el camino.
  Se puede realizar un pago mayor para incluir el valor del semen. La diferencia en las cuotas que cobra Federal Express (o la aerolínea) por ese valor mayor las debe cubrir el consignatario. Federal Express no cubre el valor del envío si se atrasa, daña o destruye por un “hecho de la naturaleza”. Si el envío se atrasa o destruye por negligencia de Federal Express, se puede interponer un reclamo para intentar recuperar los fondos.

  No tenemos conocimiento de ninguna compañía aseguradora que asegure envíos de semen congelado. Hemos contactado a varias compañías en el pasado que han estado dispuestas a redactar políticas en este sentido, pero los esfuerzos de han descontinuado por falta de interés.

• ¿Es posible exportar semen a otro país? ¿Qué implicaciones existen?

  Sí, es posible hacer envíos de semen congelado a otro país.

  Lo primero que hay que considerar es dónde cree que existe un mercado para el semen congelado de su caballo. Los países a los cuales realizamos más exportaciones de semen son Australia, Nueva Zelanda, México, Brasil y países miembros de la Unión Europea.

  La mayoría de los países tienen requerimientos escritos para la importación de semen congelado, pero existen muchos que no. Recomendamos que el comprador en el país importador obtenga un permiso de importación emitido por su ministerio de agricultura. El permiso de importación enlista las regulaciones y brinda a SBS los lineamientos a seguir con respecto al hospedaje, procesamiento y las pruebas sanitarias del semental. A pesar de que el semen que congelamos tiene una duración indefinida, los países de importación tienen derecho a cambiar sus regulaciones de importación sin notificación previa.

  Un permiso de importación podría incluir, por ejemplo, lo siguiente:

  1.) El hospedaje del semental – necesita hospedarse en el centro de colección durante el proceso o puede estar ingresando y saliendo?

  2.) El tipo y cantidad de pruebas sanitarias que se le deben realizar al semental, y el momento en que deben realizarse.

  - ¿Antes o después de la colección?

  - ¿Durante un período de tiempo a partir de que se colecta o a partir de que ingresa al centro de colección?

  - Si bien las pruebas sanitarias requeridas pueden variar entre países, las pruebas más comunes que se solicitan son MCE (Metritis Contagiosa Equina), AIE (Anemia Infecciosa Equina – prueba de Coggins), AVE (Arteritis Viral Equina).

  3.) El periodo de tiempo que el semen debe permanecer almacenado en el centro de colección antes de enviarse.

  4.) El tipo de materiales que deben utilizarse en la colección, los productos que pueden utilizarse en los diluyentes y la información que debe detallarse en el certificado de salud.

  Antes de realizar envíos internacionales requerimos una autorización por escrito del propietario del semental para enviar el semen, y formularios informativos del comprador.
  SBS se encarga de:

  - Correspondencia con el destinatario sobre los detalles del envío

  - Preparar el certificado de salud y presentarlo al Departamento de Agricultura de Estados Unidos para aprobación

  - Enviar el paquete al país de destino

  - Verificar que el destinatario reciba el contenedor

  - Seguimiento al destinatario para la devolución del contenedor a nuestras instalaciones

  También tenemos varios laboratorios afiliados en Europa y Australia. Podemos también incluir el semen de su caballo en un envío mayor a una de esas instalaciones para almacenamiento y distribución. Nuestros laboratorios afiliados cuentan con los mismos controles de calidad y políticas en relación con los envíos de semen congelado.

Uso de Semen Congelado

• ¿Debería diluir el semen después de descongelarlo y antes de la inseminación artificial?

  En SBS no recomendamos añadir diluyente después de la descongelación y antes de la inseminación. Sobre este tema, le recomendamos leer nuestro artículo Should Frozen-Thawed Semen be Diluted Prior to Insemination?

• ¿Necesito conseguir un tanque especial para almacenar el semen congelado?

  No. SBS le enviará suficiente semen para inseminar a la yegua durante un período de celo completo. Los tanques de envío son contenedores criogénicos especialmente diseñados para mantener semen congelado a una temperatura de -196°C por al menos 10 días. Esto permite a SBS enviar el semen a su veterinario con suficiente antelación a la fecha de inseminación, evitando el tipo de apuros de última hora que suele asociarse con los envíos de semen enfriado. Asimismo, si la yegua no ovula en la fecha esperada, no es necesario realizar más envíos, puesto que hay suficientes dosis de semen congelado en el tanque para inseminar la yegua de nuevo, si es necesario. Por supuesto, si usted o su veterinario tiene su propio tanque de nitrógeno líquido, el semen puede transferirse a ese tanque para almacenamiento.

• ¿Es difícil descongelar e inseminar con semen congelado?

  El proceso de descongelación e inseminación en sí es bastante sencillo. Sin embargo, es necesario seguir las instrucciones específicas de descongelación al pie de la letra para obtener la máxima supervivencia post-decongelación. Esto requiere una atención especial al detalle y un baño maría a una temperatura controlada. El protocolo de descongelación varía dependiendo del tamaño de la pajilla. Desde los 1990s SBS ha estado congelando semen en pajillas de 0.5 ml, sin embargo, el semen congelado antes de esos años puede haber sido empacado en pajillas de 5 ml. Ponemos a su disposición un protocolo de descongelación e instrucciones listas para imprimir:

  0.5mL straws

  5mL straws

  El equipo necesario para descongelar y utilizar semen congelado es:

  - Termómetro preciso

  - Baño maría

  - Pinzas hemostáticas o tenazas

  - Cronómetro 

  - Tijeras

  - Tubo de centrífuga o tubo “red top” estéril

  - Jeringa plástica

  - Pipeta de inseminación

  - Gel no-espermicida

  - Guante estéril de inseminación

  Pajillas de 0.5 ml:

  Una vez que haya realizado una limpieza aséptica al perineo de la yegua, con una pinza hemostática pre-enfriada remueva las pajillas del tanque de nitrógeno e inmediatamente colóquelas en un baño maría a 37°C. El paso de remover las pajillas del tanque e introducirlas al baño maría debe realizarse en 2-3 segundos máximo. Una vez que las pajillas se encuentren en el agua, déjelas al menos 30 segundos para asegurar una descongelación adecuada. El número de pajillas por dosis inseminante puede variar según el protocolo de congelación. El protocolo estándar de SBS es de 8 pajillas por dosis inseminante. Una vez que todas las pajillas para la inseminación hayan sido descongeladas, sáquelas del agua individualmente y séquelas. El agua puede ser espermicida si entra en contacto con el semen. Tomando las pajillas verticalmente, corte el extremo sellado. Coloque el extremo abierto de las pajillas en un recipiente estéril, pre-calentado a 37°C (tubo de centrífuga o “red top” para sangre) y proceda a cortar el tapón en el otro extremo de las pajillas, permitiendo que el semen caiga en el recipiente estéril. Golpee suavemente el fin de la pajilla para asegurar que todo el semen ha salido. Repita este procedimiento para todas las pajillas descongeladas, combinando su contenido en el mismo recipiente. SBS no recomienda añadir diluyente al semen. Introduzca el semen descongelado en una pipeta de inseminación estéril pre-calentada usando una jeringa de plástico e insemine a la yegua tal y como lo haría con semen fresco o enfriado. Use una camara de aire de 5 ml detrás del semen para asegurarse de que todo el semen se deposite en al útero de la yegua. Debe tener en cuenta que todo el equipo y el material que entre en contacto con el semen debe ser no tóxico y no espermicida.

  Pajillas de 5 ml:

  Una vez que haya realizado una limpieza aséptica al perineo de la yegua, con una pinza hemostática pre-enfriada remueva las pajillas del tanque de nitrógeno e inmediatamente colóquelas en un baño maría a 50°C. Deje la pajilla en el agua por exactamente 45 segundos e inmediatamente remueva la pajilla y colóquela en un baño maría o incubadora a 37°C. Si la pajilla se deja en el agua por unos pocos segundos más, esta exposición a una temperatura elevada puede dañar irreversiblemente los espermatozoides. Los macrotubos están sellados con bolas de acero o de vidrio, por lo cual deben descongelarse con mucho cuidado. Si no hay suficiente aire en los tubos o si la burbuja de aire no está posicionada en la mitad del tubo, la pajilla podría explotar o la bola podría ser expulsada con mucha fuerza. Es indispensable utilizar gafas protectoras al descongelar estas pajillas. Una vez descongeladas, seque bien las pajillas; el agua puede ser espermicida al entrar en contacto con el semen. Agite la pajilla para colocar la burbuja de aire al extremo de la pajilla y corte una bola selladora. Invierta la pajilla para colocar el extremo abierto en un recipiente estéril pre-calentado (37°C) y corte el otro extremo para permitir que todo el semen entre al recipiente. Introduzca el semen descongelado en una pipeta de inseminación estéril pre-calentada usando una jeringa de plástico e insemine a la yegua tal y como lo haría con semen fresco o enfriado. Use una camara de aire de 5 ml detrás del semen para asegurarse de que todo el semen se deposite en al útero de la yegua. Debe tener en cuenta que todo el equipo y el material que entre en contacto con el semen debe ser no tóxico y no espermicida.

• ¿Qué hago con el semen que no utilicé?

  Lo primero que hay que considerar es de quién es el semen. Si compró semen congelado por dosis, el semen es suyo y el semen que no haya utilizado lo puede guardar para futuros usos. SBS puede almacenar las dosis sobrantes por usted. Si recibió semen congelado como parte de un contrato de cria, el propietario de semental aun es el dueño del semen congelado. Revise su contrato o converse con el propietario del semental para discutir su política sobre dosis no utilizadas. Usualmente, se solicita que el semen no utilizado sea devuelto o destruido.

  Nota: La viabilidad del semen congelado depende de su adecuado manejo y almacenamiento, manteniendo las pajillas en nitrógeno líquido y minimizando su exposición a temperaturas mayores a -100°C. El semen se puede dañar por el manejo inadecuado durante la transferencia entre contenedores de transporte y durante su almacenamiento permanente, así como por no mantener niveles de nitrógeno líquido apropiados en los tanques de almacenamiento. Una vez que el semen sale de nuestras instalaciones SBS es imposible para nosotros verificar que si el semen ha sido dañado en la ubicación del destinatario. Según nuestra política, únicamente hacemos envíos devolutivos de dosis de semen al mismo dueño de la yegua o al propietario del semental para su uso propio.

Consideraciones Contractuales

• ¿Cómo debo vender el semen congelado?

  Típicamente, el semen congelado se vende de dos formas: por dosis (normalmente sin garantía) o con un contrato de inseminación, con provisiones muy parecidas a las de un contrato de semen enfriado. La posición de SBS es que el semen congelado debería ser usado simplemente como un medio más para cumplir la obligación del propietario del semental bajo un contrato de inseminación, y no como un commodity vendiéndose por dosis. Sentimos que este es el sistema más justo tanto para el propietario del semental como para el propietario de la yegua.

• ¿Debería dar una garantía de potro vivo?

  En nuestra opinión, si usted usualmente brinda garantía de “potro vivo” o “servicio de compensación” (return service) con semen enfriado, también debería dar la misma garantía con semen congelado. Sugerimos que los contratos de inseminación se estructuren de forma tal que los costos asociados a la producción de semen estén separados del valor asociado a la genética. De esta forma, el propietario de la yegua paga una tarifa fija no-reembolsable que cubre los costos de producción del semen requerido para la inseminación a realizar en dos ciclos, usando el protocolo de dos dosis. El saldo es la tarifa correspondiente al valor genético del semental, lo cual únicamente se paga si se logra la preñez y se produce el potro. El contrato puede ser redactado para establecer “hasta N dosis por temporada”, luego de lo cual el propietario de la yegua tiene la opción de comprar dosis adicionales a un costo mayor por dosis, si quiere continuar intentando preñar a esa yegua. El saldo correspondiente al valor genético del semental únicamente se paga si se logra la preñez y se produce el potro.

• ¿Cuántas dosis debería enviar por ciclo?

  La mayoría de nuestros clientes entregan dos dosis por ciclo cuando hacen envíos de semen congelado. Esto permite al veterinario usar un protocolo de inseminación programada si es apropiado. Algunos clientes envían únicamente una dosis por ciclo, lo cual requiere un manejo muy estricto de la yegua para lograr que la inseminación ocurra en el período comprendido entre 12 horas antes y seis horas después de la ovulación. Cualquiera de los dos mecanismos funciona siempre y cuando el intervalo entre la inseminación y la ovulación se haga dentro de ese periodo crítico. Hay algunos factores importantes a considerar antes de tomar esta decisión.

  - Si se envían muy pocas dosis hay una posibilidad de que la inseminación se realice muy pronto en relación con la ovulación de una yegua si esta mantiene un folículo por más tiempo el anticipado, o no responde al agente ovulatorio. En este caso se podría requerir un segundo envío para permitir la inseminación al momento indicado. Por esta razón, SBS recomienda que cuando solo se ha enviado una dosis de semen, las yeguas se examinen en intervalos de seis horas alrededor del tiempo esperado de ovulación, y que se realice una inseminación dentro de las seis horas siguientes a la ovulación.

  - Si se envían múltiples dosis por ciclo, existe la posibilidad de que la yegua se preñe con una sola dosis y sobren algunas dosis (probablemente almacenadas en la clínica veterinaria), sobre las cuales se deben poner de acuerdo. Si el semen se vende por contrato en lugar de por dosis, lo mejor es asegurarse de especificar en el contrato lo que se debe hacer en ese caso, de quién son esas dosis y qué se debe hacer con ellas. 

  A algunos propietarios les preocupa que, si el semen se vende por contrato y la yegua original se preña con una sola dosis, las dosis sobrantes pueden ser vendidas a un tercero o utilizadas para inseminar otra yegua adicional sin pagar el precio por preñez adicional. Esto no es un problema en los casos en que se requiere un certificado para registrar al potro, cuando el registro es importante. Recomendamos al propietario del semental que especifique la política sobre el uso de semen no utilizado en el contrato, y que requiera que el veterinario que insemina firme un certificado de inseminación donde especifique la yegua inseminada y las fechas en que se realizaron las inseminaciones, y que las dosis sobrantes sean devueltas o destruidas, según indique el contrato.

• ¿Cómo debería estructurar mi contrato de inseminación?

  En SBS sugerimos que los contratos de inseminación con semen congelado se estructuren de forma tal que los costos asociados con la producción del semen se separen del valor asociado a la genética. El propietario de la yegua paga una cuota de reserva no reembolsable, establecida a partir de los costos de producción del semen en cuestión. El saldo restante, o cuota por servicio del semental, es por la genética del semental, y debe pagarse únicamente si se logra la preñez y la producción del potro. El contrato se puede redactar para determinar “hasta N dosis por la temporada”, luego de lo cual el propietario de la yegua tiene la opción de comprar dosis adicionales a un costo mayor por dosis, si quiere seguir intentando preñar a la yegua. Otra opción es ofrecerle la oportunidad de regresar en la temporada siguiente, en cuyo caso pagaría nuevamente la cuota de reserva. El costo el envío de semen congelado lo paga el propietario de la yegua, y en algunos casos esto es más barato que cubrir los costos e colección, procesamiento y envío de semen enfriado.

  Para calcular los costos de producción del semen congelado para cada yegua, divida el costo total del congelamiento de semen por el número de dosis congeladas –esto le da el costo por dosis. Basado en ese número de dosis puede decidir cuántas asignar por yegua por temporada, y así calcular su costo por yegua.

• ¿Por qué SBS recomienda vender semen congelado como parte de un contrato en lugar de por dosis?

  1) A diferencia del semen de toro, que es vendido por dosis como un commodity, el semen congelado de sementales jóvenes no es evaluado minuciosamente antes de comercializarse. Un productor lechero que compra una dosis de semen de un toro Holstein de una compañía de genética o I.A. de buena reputación, puede estar muy seguro del potencial de fertilidad de esa dosis de semen siempre y cuando la misma sea manejada adecuadamente y utilizada en una vaca fértil. Esto es así porque los sementales bovinos han sido reproducidos selectivamente tanto por producción de leche como por fertilidad, y específicamente por fertilidad en un programa de inseminación artificial con semen congelado. El rango de fertilidad por ciclo en toros comerciales para genética es muy pequeño, y solo unos pocos puntos porcentuales separan a un toro de alta fertilidad de uno de baja fertilidad. Además, el semen congelado de toros con baja fertilidad no es comercialmente viable, por lo que es excluido de la producción comercial y nunca llega al mercado. La evaluación de fertilidad del semen congelado de un semental bovino joven involucra la inseminación de miles de vacas para brindar un estimado de fertilidad para ese toro particular, y en base a eso se decide mantener al toro o excluirlo de la producción comercial. Comparemos esto con la situación de los caballos. Aun si se tuvieran suficientes yeguas disponibles, los sementales no producen suficientes dosis para I.A. por eyaculado requeridas para evaluar la fertilidad del semen congelado de forma práctica o rentable. A los sementales no se les selecciona por fertilidad, ni mucho menos por la resistencia del semen a la congelación. Un propietario de una yegua lo más que puede esperar es que el semen haya sido congelado en un laboratorio respetable, con protocolos probados, que el semen congelado haya sido objeto de una evaluación post-congelación y que el semen que esté siendo comercializado alcance estrictos estándares de calidad basados en los ensayos de laboratorio disponibles. Nuestra posición es que el riesgo asociado a la reproducción de caballos (por cualquier método) debe ser compartido entre el propietario del semental y el de la yegua.

  2) La venta de semen por dosis promueve que los propietarios de las yeguas intenten minimizar el número de dosis utilizadas (compradas) para lograr la preñez con el menor costo. Este enfoque tiene como consecuencia costos veterinarios mucho más altos para el manejo de la inseminación de la yegua y puede resultar en una menor fertilidad en el intento de conservar dosis de semen.

  3) El semen congelado vendido por dosis muchas veces se vende sin restricción con respecto al número de certificados a emitir, y esto puede motivar a los propietarios de yeguas a dividir múltiples dosis para la inseminación de más de una yegua. Esto tiene el potencial de provocar una tasa menor de fertilidad de muchos sementales y además generar problemas contractuales entre los propietarios de sementales y yeguas.

• ¿Por qué muchos propietarios de sementales venden semen por dosis?

  Las razones que dan los propietarios de sementales para vender semen por dosis son:

  1) No tienen control sobre cómo el semen se maneja y utiliza, por lo tanto, no quieren ser responsables si el propietario de la yegua y su veterinario no manejan bien a la yegua y desperdician semen. Consideran que esto es especialmente cierto si el semen se envía a un intermediario en otro país y luego es vendido al propietario de la yegua.

  2) Se les paga por adelantado y no tienen que preocuparse de que haya un mal manejo que resulte en baja fertilidad

  3) Normalmente cobran una tarifa por dosis que es equivalente a aproximadamente 1/3 o 1/2 del costo de un contrato con garantía, y ese monto es por lo general bastante mayor al costo de producción del semen congelado.

  La ventaja en este caso es totalmente para el propietario del semental, mientras que el propietario de la yegua asume todo el riesgo a un costo significativo.